本试剂盒仅限于科学研究用途,严禁用于医学诊断。以下是人白介素1(IL-1)ELISA试剂盒的使用说明和检测原理。
检测原理:本试剂盒采用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA)。首先,将包含已包被adropin(AD)抗体的微孔板中,逐步添加样本、标准品及HRP标记的检测抗体,经过适当温育后进行彻底洗涤。随后,运用底物TMB进行显色反应,TMB在过氧化物酶的作用下形成蓝色,再在酸性环境下转变为最终的黄色。颜色的变化程度与样本中adropin(AD)的浓度呈正相关。最终使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),以此计算样本浓度。
样本的收集、处理及保存:
1. 血清:请使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免细胞刺激。采集血液后,3000转/min离心10分钟,以迅速小心地分离血清和红细胞。
2. 血浆:可使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转/min离心30分钟后收集上清。
3. 细胞上清液:以3000转/min离心10分钟,去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织添加适量生理盐水进行捣碎,3000转/min离心10分钟后取上清。
5. 保存:若样本在收集后未能及时检测,请按每次用量分装并冷冻存储于-20℃,避免反复冻融。解冻时需在室温下进行,并确保样本均匀充分解冻。
试剂盒组成:标准品(S0-S5)的浓度依次为:0、25、50、100、200、400 pg/mL。
试剂准备:20×洗涤缓冲液需用蒸馏水按1:20比例稀释,即1份20×洗涤缓冲液需加19份蒸馏水。
结果判断:在Excel工作表中绘制标准曲线,以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘制线性回归曲线,通过曲线方程计算各样本的浓度值。
免责声明:请注意,使用本试剂盒应严格遵循相关实验室安全规范与操作流程。
本产品为俄罗斯专享会294品牌,致力于生物医疗领域的研究开发,确保提供优质的科研服务。