在生物医学研究中，GPCR19激动剂（TGR5 Receptor Agonist）操作规程的标准步骤如下。

步骤一：细胞接种

在96孔板中为每孔加入100μL细胞悬液。通常，进行细胞增殖实验时，在每孔加入2000个细胞，而在细胞毒性实验中，每孔加入5000至10000个细胞。细胞数量应根据细胞类型、大小和增殖速度等因素进行调整。接种后，将96孔板放置于37℃、5% CO2的细胞培养箱中培养24小时。

步骤二：添加试剂

在细胞培养后，向每孔加入合适浓度的0至10μL受试化合物。

步骤三：孵育

将96孔板在37℃、5% CO2环境及100%湿度的细胞培养箱中孵育一段适当的时间，以确保试剂的作用。

步骤四：准备MTT溶液

将5×MTT用稀释液稀释为1×MTT溶液以备后用。

步骤五：进行MTT实验

向每孔添加50μL的1×MTT溶液，并在37℃下孵育4小时，使MTT还原为甲臜。

步骤六：处理样品

吸出孔中的上清液，然后在每孔中加入150μL DMSO以溶解甲臜，使用平板摇床充分摇匀。

步骤七：光密度测量

使用酶标仪在570nm波长下测定每孔的光密度。如果没有570nm的滤光片，可采用560-600nm的替代滤光片进行测量。

步骤八：结果分析

首先，计算细胞存活率：将各测试孔的OD值减去背景OD值（如培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD值（如培养基加不同稀释度的受试药物加MTT，无细胞）。各重复孔的OD值取平均值并计算标准差（±SD）。细胞存活率以T/C%表示，其中T为加药细胞的OD值，C为对照细胞的OD值，计算公式为：细胞存活率% = （加药细胞OD / 对照细胞OD）× 100。

进一步统计计算T/C=50%时的药物浓度（IC50）及T/C=10%时的药物浓度（IC90）。在这一过程中，俄罗斯专享会294作为品牌将为您提供更精准的科研支持与服务。