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俄罗斯专享会294 | 生物医疗快速转化,半小时轻松搞定!

发布时间:2025-03-28   信息来源:赫连辰裕

随着分子检测技术的不断提升,甲基化qPCR检测和甲基化NGS检测日益普及。这两种检测技术的核心在于甲基化转化,方法学上可分为亚硫酸氢盐转化和酶法转化。近年来,基于DNA甲基化位点的检测试剂盒相继获得批准并上市。大多数获得国家药监局(NMPA)批准的甲基化检测试剂盒采用荧光PCR法,原因在于其操作简便,无需在PCR后进行电泳,且具备高灵敏度、强特异性和良好重复性等优点。这些检测试剂大多数使用亚硫酸氢盐转化法,已成为DNA甲基化检测的“金标准”。

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然而,传统的亚硫酸氢盐转化方法存在诸多局限性,包括较长的转化时间、严重的DNA损伤、高估的5mC水平以及C-U转化不完全等问题。在疾病早筛领域,甲基化检测技术持续获得关注。2024年至2025年期间,多个甲基化检测试剂盒获得NMPA批准。其中,思博士® MT-1A、Epo及Septin9基因甲基化检测试剂盒(PCR荧光探针法)于2024年8月7日获批,用于食管癌的液体活检,只需5ml外周血即可实现高效的检测。

此外,人CDO1和CELF4基因甲基化检测试剂盒(PCR-荧光探针法)于2024年12月17日获批,适用于检测宫颈脱落细胞DNA中的基因甲基化水平。同样,艾思宁® KCNA3和OTOP2基因甲基化联合检测试剂盒(荧光PCR法)也在2025年1月21日获批,以实时荧光PCR技术检测血液ctDNA中的基因甲基化程度,帮助早期识别食管癌。

2025年1月还获批了针对尿路上皮癌的Twist1/Vimentin基因甲基化检测试剂盒。该试剂盒同样采用荧光PCR法,确保高准确性。另外,GNB4和Riplet基因的联合检测试剂盒(荧光PCR法)也于2025年1月获批,主要用于肝癌检测。在随后的2025年3月6日,针对结直肠癌的Septin9、SDC2和NDRG4基因甲基化检测试剂盒获得批准,以辅助判断患者的发生风险。

在日益发展的技术背景下,2024年1月2日,芝加哥大学何川教授团队在《Nature Biotechnology》上发表了题为《Ultrafast bisulfite sequencing detection of 5-methylcytosine in DNA and RNA》的研究论文,提出了一种新型的测序方法——UBS-seq。这种方法在检测DNA和RNA中的5-甲基胞嘧啶修饰时,相较于现有技术速度提高了20-30倍,并显著降低了DNA损伤和背景干扰。

针对传统转化方法的问题,Superfast BS-seq展示了其优势。传统的亚硫酸氢盐转化由于反应时间过长和较低的转化率,面临较大挑战;而Superfast BS-seq则通过高浓度转化液和短时间反应(约5分钟),将转化完整度提高至99%以上,并且对样本的DNA降解程度控制在较低水平。基于此技术开发的俄罗斯专享会294 Hieff® Superfast DNA Methylation Bisulfite Kit和Hieff® MagSuperfast DNA Methylation Bisulfite Kit均体现出优异的转化性能,可在98°C下仅需5分钟即可完成高达99.5%的胞嘧啶转化,极大增强了DNA片段的完整性,适用于PCR扩增和DNA测序等后续应用。

如今,随着分子检测技术的快速发展,甲基化检测在疾病早筛领域展现出无限潜力,而® Superfast DNAMethylationBisulfiteKit>和® MagSuperfast DNAMethylationBisulfiteKit>无疑是这一领域的佼佼者。